Συγχρονισμός του οίστρου στο πρόβατο με τη χρήση εκλυτικής ορμόνης γοναδοτροπινών

Abstract

Σκοπός του πειράματος, ήταν α) η εφαρμογή ενός πρωτοκόλλου συγχρονισμού του οίστρου στα πρόβατα, που βασίζεται στη χρήση ενός αναλόγου GnRH σε συνδυασμό με προσταγλανδίνη PGF2α και η σύγκρισή του με ένα κλασσικό πρωτόκολλο συγχρονισμού του οίστρου, με τη χρήση ενδοκολπικών σπόγγων και χορήγηση eCG και β) η διερεύνηση της μέτρησης της συγκέντρωσης της PAG (πρωτεΐνες που σχετίζονται με την εγκυμοσύνη) για τη διάγνωση της εγκυμοσύνης στο πρόβατο. Χρησιμοποιήθηκαν 30 πρόβατα, παρόμοιου σωματικού βάρους τα οποία χωρίστηκαν σε δύο ομάδες των 15 ατόμων η κάθε μία. Στην πρώτη ομάδα το πρωτόκολλο συγχρονισμού περιελάμβανε την εισαγωγή ενδοκολπικών προγεσταγονούχων σπόγγων, που παρέμειναν για 14 ημέρες και κατά την εξαγωγή τους χορηγήθηκαν 350IU ίππειας χοριακής γοναδοτροπίνης (eCG). Η εισαγωγή των κριών έγινε 24 ώρες μετά τη χορήγηση της eCG και ακολούθησε η παρατήρηση και καταγραφή των οίστρων. Ως ημέρα 0 θεωρήθηκε η ημέρα εισαγωγής των κριών. Στη δεύτερη ομάδα το πρωτόκολλο συγχρονισμού περιελάμβανε μια ενδομυϊκή έγχυση ενός GnRH αναλόγου που ακολουθήθηκε από έγχυση προσταγλανδίνης επτά ημέρες μετά. Τριάντα έξι ώρες μετά την έγχυση της προσταγλανδίνης έγινε μια δεύτερη χορήγηση GnRH. Η εισαγωγή των κριών έγινε 12-14 ώρες μετά την εφαρμογή της δεύτερης GnRH και ακολούθησε ανίχνευση και καταγραφή του οίστρου. Ως ημέρα 0 θεωρήθηκε η ημέρα εισαγωγής των κριών. Δείγματα γάλακτος λαμβάνονταν δύο φορές την εβδομάδα και για διάστημα ενός μηνός, πριν την έναρξη του πειράματος που έλαβε χώρα το πρώτο δεκαπενθήμερο του Ιουνίου για την μέτρηση των επιπέδων της προγεστερόνης. Δείγματα αίματος ελήφθησαν πριν από την έναρξη κάθε ορμονικής αγωγής και στη συνέχεια την 2η, 5η, 8η, 11η, 14η, 17η, 22η, 29η, 36η, 45η ημέρα μετά την εισαγωγή των κριών για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης της προγεστερόνης. Επίσης στα δείγματα των ημερών 22, 36, 29 και 45 έγινε προσδιορισμός της συγκέντρωσης της PAG. Στην πρώτη ομάδα 7 ζώα γονιμοποιήθηκαν στον πρώτο, ενώ 6 στο δεύτερο (4) και τρίτο (2) κύκλο μετά το συγχρονισμό. Τα υπόλοιπα 2 ζώα παρέμειναν στην άνοιστρη περίοδο. Στη δεύτερη ομάδα 4 ζώα παρουσίασαν κυκλική ωοθηκική δραστηριότητα μετά την εφαρμογή του πρωτοκόλλου συγχρονισμού, αλλά μόνο ένα ζώο γονιμοποιήθηκε κατά τον κύκλο που ακολούθησε την αγωγή. Η μέτρηση των επιπέδων της προγεστερόνης στο γάλα έδειξε ότι τα υπόλοιπα ζώα βρίσκονταν σε άνοιστρη περίοδο. Η συγκέντρωση της PAG παρουσίασε σημαντική αύξηση από την 29η μέρα στα έγκυα ζώα, ενώ στα μη έγκυα παρέμεινε μη ανιχνεύσιμη. Τα αποτελέσματα αυτά επιβεβαιώνουν το γεγονός ότι η επιτυχία τηs μεθόδου συγχρονισμού με τη χρήση GnRH προϋποθέτει την ύπαρξη λειτουργικού ωχρού σωματίου. Παρ’ όλα αυτά η αντίδραση των ζώων στην GnRH σε συνδυασμό με το γεγονός ότι η συγκεκριμένη αγωγή επιτρέπει την οχεία η την τεχνητή σπερματέγχυση σε προκαθορισμένο χρόνο την καθιστούν μια υποσχόμενη μέθοδο για τον έλεγχο των ωοθυλακιορρρηξιών στο πρόβατο, η οποία αξίζει να διερευνηθεί περισσότερο. Επιπλέον η μέτρηση της PAG από την 29η ημέρα και μετά αποτελεί μια αξιόπιστη μέθοδο για την πρώιμη διάγνωση της εγκυμοσύνης στο πρόβατο. Λέξεις κλειδιά: Μικρά μηρυκαστικά, ωοθηκικός κύκλος, ελεγχόμενη αναπαραγωγή, πρωτόκολλα, συγχρονισμός οίστρου, PAG.

This study was conducted in order to compare two estrus synchronization protocols, one based on the use of progestagen sponges followed by eCG administration and a novel one based on the use of a GnRH analogue. Mature, cross breed sheep of similar age and body weight were used and randomly assigned in one of the following groups. In group 1 estrus synchronization was based on treatment with intravaginal progestagen sponges followed by an intramuscular injection of eCG on the day of sponge withdrawal. In group 2 estrus synchonization protocol consisted of an initial administration of a GnRH analogue followed 5 days later by a prostaglandin F2α administration. Thirty six hours later a second GnRH injection was given to synchronize ovulation. Fertile rams were introduced and estrus detection was carried out. Blood samples were collected on day 0 and on 2η, 5η, 8η, 11η, 14η, 17η, 22η, 29η, 36η, 45η day after ram introduction. In addition milk samples were collected biweekly during one month before the start of the experiment (June) for the determination of progesterone levels. In the first group 7 ewes conceived during the first estrus followed synchronization and maintained pregnancy, while another 6 ewes conceived during the second (4) or third (2) estrus followed synchronization. Two of the ewes returned to anestrus. In the second group 4 out of 15 animals exhibited an ovarian cyclycity after treatment, but only one ewe conceived during the first cycle after treatment. Milk progesterone levels indicated that the animals were in the anestrus period. Pregnancy associated proteins (PAG) concentration was increased from day 29 onwards in pregnant animals, while remained undetectable in non pregnant ones. The results of the present study confirmed that effectiveness of GnRH –PGF2α protocol is dependent on the existence of a functional corpus luteum. Progesterone levels, as measured in milk samples indicated that animals were in anestrous period. However the induction of cyclic activity in conjunction with the ability of this method to synchronize ovulations make it a promising tool for estrus synchronization in sheep for fixed time insemination. Results of the present study also indicated that the measurement of PAG may be used for early pregnancy diagnosis in sheep. Key Words: Small ruminative, ovarian circle, controlled reproduction, protocols, oestrus synchronisation, PAG.