Μελέτη του πολλαπλασιασμού του Anagyris foetida L. in vitro

Abstract

Το είδος A. foetida αυτοφύεται σε περιοχές της Μεσογείου, της Νοτιο Ανατολικής και Δυτικής Ευρώπης και της Μικράς Ασίας, συναντάται στα βορειοαφρικανικά παράλια και σε παραμεσόγειες περιοχές. Πρόκειται για ημιαειθαλή θάμνο που ανήκει στην οικογένεια Fabaceae που θα μπορούσε να αξιοποιηθεί ως καλλωπιστικό είδος, σε προγράμματα ανάπλασης υποβαθμισμένων και με διαβρωμένο έδαφος τοπίων αστικών και περιαστικών περιοχών. Χρησιμοποιείται για ερευνητικούς σκοπούς στον κλάδο της φαρμακοβιομηχανίας λόγω πολύτιμων ουσιών που περιέχονται στα φύλλα και στο φλοιό του. Στην παρούσα εργασία εξετάστηκε η βλαστικότητα σπόρων του είδους Α. foetida κατόπιν διαφόρων προμεταχειρήσεων, ήτοι με π. H2SO4, σκαριφισμό, συνδιασμό των παραπάνω και παραμονή τους σε H2O 40 °C για 24 h. Στη συνέχεια οι σπόροι απολυμάνθηκαν και τοποθετήθηκαν σε in vitro καλλιέργεια, σε γυάλινα δοχεία με στερεό θρεπτικό υπόστρωμα αλάτων MS στους 20 °C και 16 h φωτοπερίοδο, υπό 37,5 μmol m - 2 φωτισμό λαμπτήρων φθορίου. Η βλαστικότητα των σπόρων κυμάνθηκε σε πολύ χαμηλά επίπεδα της τάξης του 28,57%. Επίσης διερευνήθηκε σε in vitro καλλιέργεια η επίδραση των κυτοκινινών BA, ZEAT, 2-ip, και ΚΙΝ στην in vitro βλαστογένεση του είδους Α. foetida. Το ποσοστό βλαστογένεσης κυμάνθηκε από 55% έως 100%. Έκπτυξη μεγαλύτερου αριθμού βλαστών παρατηρήθηκε κατά την υποκαλλιέργεια εκφύτων σε υπόστρωμα MS με 1,0 ή 2,0 mg l 1 | Anagyris foetida πολλαπλασιασμός in vitro - 1 ΒΑ. Υποκαλλιέργειες εκφύτων Α. foetida σε συγκεντρώσεις 0,5 ή 2,0 mg l - 1 ΒΑ παρουσίασαν το μεγαλύτερο μήκος βλαστών. Υψηλότερο δυναμικό πολλαπλασιασμού παρατηρήθηκε κατά την υποκαλλιέργεια εκφύτων σε υπόστρωμα MS με 0,5 ή 2,0 mg l - 1 ΒΑ. Μετά από υποκαλλιέργειες στα ανωτέρω υποστρώματα, αξιολογήθηκε η ριζοβολία των μικροβλαστών σε υπόστρωμα υποδιπλασιασμένης δύναμης MS παρουσία ή μη διαφορετικών συγκεντρώσεων ΙΒΑ, ΝΑΑ και ΙΑΑ. Επίσης εξετάστηκε η επίδραση ενεργού άνθρακα (CA). Η ριζοβολία ήταν ανεπιτυχής καθώς το μεγαλύτερο ποσοστό που επετεύχθη ήταν 19%. Επίσης ανεπιτυχής ήταν ο εγκλιματισμός των ριζοβολημένων φυταρίων σε ex-vitro συνθήκες.

Anagyris foetida (Bean trefoil) occurs naturally and has centres of diversification in areas of the Mediterranean, the South Eastern and Western Europe, Asia, in the North African coast and Mediterranean rim region. It is a shrub species belonging to the Fabaceae family, that could be introduced as ornamental, in redevelopment projects of degraded and eroded urban and suburban landscapes and to the pharmaceutical industry due to various precious substances in their leaves and stem. The present thesis investigated seed germination of the above species, following various handling techniques such as concentrated sulfuric acid or scarification or combining the above and then remaining of seeds in H O and at 40 °C for 24 h. The seeds were then disinfected and placed in glass containers with a solid MS nutrient substrate at 20 °C and a 16 hour photoperiod, under 37.5 μmol m 2 of fluorescent lamp illumination. Seed germination ranged at very low level of 28,57%. A thorough investigation of the effectiveness of cytokinin BA, ZEAT, 2-ip, and ΚΙΝ on vitro shoot production of Anagyris foetida was undertaken. Blastogenesis rates ranged between 55% and 100%. Most shoots per explant were observed in the subculture of explants on an MS substrate with 1.0 and 2.0 mg l - 1 BA. Subculture of A. foetida explants in concentrations of 0.5 and 2.0 mg l BA showed the longer shoots length, while a higher proliferation potential was observed in the subculturing of explants on an MS substrate with 0.5 and 2.0 mg l - 1 BA. Following subculturing on the above substrates, explant rooting was evaluated on a submultipulated MS force substrate with or without different concentrations of IBA, NAA and IAA. Also, the effect of activated carbon (CA) was examined. The rooting of microshoots reached very low levels ranging from from 0% to 19%. Rooted microshoots ex vitro acclimatization was unsuccessful.