Αξιολόγηση και ομαδοποίηση των εκτιμήσεων ποσοτικοποίησης του βαθμού προσβολής από Νοσεμίαση (N. ceranae και N. apis), σε δείγματα μελισσών για την εναρμόνιση των εργαστηριακών ελέγχων

Abstract

Η προσβολή της μέλισσας Apis meliffera από το μικροσπορίδιο Nosema spp. προκαλεί μια από τις πιο σοβαρές ασθένειες των ενήλικων μελισσών, τη Νοσεμίαση. Παρ’ όλα αυτά, ο προσδιορισμός της προσβολής δεν έχει οριστεί σε αντικειμενικά πλαίσια, καθώς δεν υπάρχει κοινή προσέγγιση από την ερευνητική κοινότητα στο επιστημονικό αυτό θέμα. Κύριος σκοπός της διπλωματικής εργασίας είναι η δημιουργία ενός κοινού πρωτοκόλλου, όπου θα είναι εύκολο, άμεσο στη χρήση και αποτελεσματικό με στόχο την εναρμόνιση των εργαστηριακών ελέγχων. Για το σκοπό αυτό δημιουργήθηκαν 102 παρασκευάσματα, λήφθηκαν 536 φωτογραφίες με φορητή συσκευή μέσω οπτικού μικροσκοπίου, στάλθηκαν ερωτηματολόγια σε 12 εξειδικευμένους αξιολογητές στην Ελλάδα και μετρήθηκαν σπόρια Nosema spp. από τις φωτογραφίες. Σε ένα σύνολο εικόνων με εύρος σπορίων από 0-4871, μελετήθηκαν δύο περιπτώσεις. Η πρώτη αφορούσε έξι βαθμούς προσβολής με την εξής εν δυνάμει ομαδοποίηση: «Καθόλου»:0-10, «Πολύ μικρή προσβολή»:10-150, «Μικρή προσβολή»:40-350, «Μέτρια Προσβολή»:100-750, «Μεγάλη προσβολή»:200-1700, «Πολύ μεγάλη προσβολή»:>700 σπόρια Nosema spp. Η δεύτερη περίπτωση αφορούσε τέσσερις βαθμούς προσβολής με την εξής εν δυνάμει ομαδοποίηση: «Καθόλου»:0-10 σπόρια, «Μικρή προσβολή»:2-353, «Μέτρια Προσβολή»: 120-750, «Μεγάλη προσβολή»:>800 σπόρια Nosema spp. Χρειάζεται να σημειωθεί πως δεν υπάρχουν στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των δύο διαφορετικών περιπτώσεων. Επιπλέον, εξετάστηκαν και αναλύθηκαν δύο μέθοδοι προσέγγισης των αποτελεσμάτων, η πλειοψηφία των αξιολογήσεων (MR) και ο μέσος όρος των αξιολογήσεων (AR). Αναφορικά με τις δύο μεθόδους χρειάζεται να σημειωθεί πως δεν υπάρχουν στατιστικά σημαντικές διαφορές τόσο στην περίπτωση των έξι, όσο και των τεσσάρων βαθμών προσβολής. Τέλος αποδείχθηκε η διακρίβωση της μεθόδου με τη φορητή συσκευή, καθώς δεν υπάρχει διαφορά στον αριθμό σπορίων στο μικροσκόπιο με την μέτρηση του αριθμού σπορίων της φωτογραφίας.

The infestation of the honey bee Apis meliffera by the microspore Nosema spp. causes Nosemosis, which is one of the most severe diseases of adult bees. However, the definition of infestation has not been defined in an objective context, as there is no standard approach by the research community to this scientific issue. The aim of this study is to create a standard protocol, which will be easy, direct to use, and practical to harmonize laboratory tests. During the study, 102 preparations were created, 536 photographs were taken with a portable device through an optical microscope, questionnaires were sent to 12 specialized evaluators in Greece and Nosema spp. spores were counted from the photographs. In a spore range 0-4871, two cases were studied. The first concerning the six degrees of infestation with the following potential grouping: "Not at all":0-10, "Very light infestation":10-150, "Light infestation":40-350, "Medium infestation":100-750, "Heavy infestation":200-1700, "Very heavy infestation":≥700 spores of Nosema spp. The second case consists of four degrees of infestation with the following potential grouping: "Not at all":0-10 spores, "Light infestation":2-353, "Medium infestation":120-750 and “Heavy infestation” :>800 spores Nosema spp. It should be noted that there are no statistically significant differences between the two different levels of infection. In addition, two methods of approaching the results were examined and analyzed, the Majority of Ratings (MR) and the Average of Ratings (AR). Regarding the two methods, it should be noted that there are no statistically significant differences in the case of both six and four degrees of infection. Finally, the method was calibrated using the mobile device, as there is no difference in the number of spores counted in the microscope and the number of spores in the photograph.